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酶聯(lián)免疫定量檢測技術平臺
原理簡介
1971年Engvall和Perlmann發(fā)表了酶聯(lián)免疫吸附劑測定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量測定的文章,使得1966年開始用于抗原定位的酶標抗體技術發(fā)展成液體標本中微量物質的測定方法。這一方法的基本原理是:①使抗原或抗體結合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與其他物質分開,最后結合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質的量成一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據(jù)顏色反應的深淺刊物定性或定量分析。由于酶的催化頻率很高,故可極大地地放大反應效果,從而使測定方法達到很高的敏感度。
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u 微測時間分辨熒光標記示蹤物均采用納米微球包裹技術,每個微球內可包裹成千上萬的示蹤物,比普通標記技術靈敏度提高2-3個數(shù)量級,甚至比DELFIA技術高1-2個數(shù)量級,且采用共價連接,穩(wěn)定性更優(yōu)。